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植物類黃酮含量檢測試劑盒說明書
點擊次數：1503 更新時間：2020-09-02
植物類黃酮含量檢測試劑盒說明書
注意：正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定。
規格：100T/48S
產品說明：
類黃酮是一類多苯化合物，屬于植物次生代謝物，對人體具有消炎，抗菌，降血脂，清除體內羥自由基，預防癌癥等作用。
自備實驗用品及儀器：
天平、烘箱、粉碎儀、篩子、超聲破碎儀、60%乙醇、離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96 孔板、蒸餾水。
操作步驟：
一、測定操作表
1、 分光光度計或酶標儀預熱 30min 以上，調節波長至 470nm，蒸餾水調零。
2、 操作表
| 對照管 | 測定管 | 標準管 | 空白管 |
樣本待測液（µL） | 60 | 60 |
|
|
標準溶液（μL） |
|
| 60 |
|
蒸餾水（μL） |
|
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| 60 |
試劑一（µL） | 15 | 15 | 15 | 15 |
混勻，室溫靜置 5min | ||||
試劑二（µL） |
| 15 | 15 | 15 |
混勻，室溫靜置 5min | ||||
試劑三（µL） | 120 | 120 | 120 | 120 |
60%乙醇（µL） | 105 | 90 | 90 | 90 |
混勻，37℃水浴 45 min，10000g，10min 離心取上清，取 200µL 于微量玻璃比色皿/96 孔板中測定 A470。計算ΔA=A 測定-A 對照，ΔAˊ=A 標準-A 空白。 | ||||
二、類黃酮含量計算
1、 標準曲線繪制
以單寧酸濃度為橫坐標，ΔAˊ為縱坐標繪制標準曲線 y=kx+b，將ΔA 帶入方程求得 x； 2、 按樣本鮮重計算
類黃酮含量（mg/g 鮮重）= x×V 提取÷W=x÷W 3、 按樣本蛋白濃度計算
類黃酮含量（mg/ mg prot）= x×V 提取÷(Cpr×V 提取) = x÷Cpr
V 提取：加入提取液體積，1mL；W：樣本鮮重，g；Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL。
注意事項：
1、 OD 值大于 0.4，樣品適當稀釋再測定，注意計算公式里乘以稀釋倍數。
2、 顯色完成后立即測定，2 小時后吸光值會下降。
實驗代做服務：
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